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正相色譜和反相色譜的區(qū)別

更新時間:2022-11-03 點(diǎn)擊次數(shù):3636
  本質(zhì)上是填料(固定相)的不同,正相色譜柱填料極性強(qiáng),洗脫順序由弱到強(qiáng);反相色譜柱填料極性弱,洗脫順序由強(qiáng)到弱。
 
  1、正相色譜
 
  正相色譜用的固定相通常為硅膠(Silica)以及其他具有極性官能團(tuán)胺基團(tuán),如(NH2,APS)和氰基團(tuán)(CN,CPS)的鍵合相填料。由于硅膠表面的硅羥基(SiOH)或其他極性基團(tuán)極性較強(qiáng),因此,分離的次序是依據(jù)樣品中各組分的極性大小,即極性較弱的組份最先被沖洗出色譜柱。正相色譜使用的流動相極性相對比固定相低,如正已烷、氯仿、二氯甲烷等。
 
  2、反相色譜
 
  反相色譜用的填料常是以硅膠為基質(zhì),表面鍵合有極性相對較弱官能團(tuán)的鍵合相。反相色譜所使用的流動相極性較強(qiáng),通常為水、緩沖液與甲醇、乙腈等的混合物。樣品流出色譜柱的順序是極性較強(qiáng)的組分最先被沖洗出,而極性弱的組分會在色譜柱上有更強(qiáng)的保留。

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