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排除輔料對目標物質的干擾

更新時間:2022-09-07 點擊次數(shù):1381

極性較大的化合物在分析測試過程中,通常在常規(guī)非極性柱上保留很弱,即便有機相比例降到很低,也很難實現(xiàn)保留增強,易受空白溶劑或空白輔料的干擾,于是排除干擾就成了方法設定中很重要的一個環(huán)節(jié)。


應用實例

氨基丁酰胺的極性大,紫外吸收弱,在常規(guī)C18柱上幾乎無保留,輔料空白對其測定有干擾。

結構如圖所示:

微信截圖_20220907090935.png

原條件

色譜柱:Ultimate® AQ-C18(4.6×250mm,5μm)。

流動相:磷酸鹽緩沖液:乙腈=95:5;

分析

目標峰極性大,在C18柱上無保留,在3分鐘左右出峰,與輔料空白重合,無法分離。

藍色—輔料峰    黑色—目標物

微信截圖_20220907090941.png

方法開發(fā)思路

要使目標物質與輔料分離,必須增強目標化合物的保留能力。該物質結構上有兩個氨基,可考慮流動相中加離子對試劑的模式測定,結合其檢測波長(205nm),可選擇在流動相體系中加入十二烷基硫酸鈉進行測定,通過方法調整優(yōu)化,可排除空白輔料對雜質的干擾。

調整后的色譜條件

色譜柱:Ultimate® XB-C18(4.6×250mm,5μm)。

流動相:0.01mol/L磷酸二氫鉀+0.5g/L十二烷基硫酸鈉(pH2.5)/乙腈=70/30。

微信截圖_20220907090948.png

分析

與預期一致,目標化合物的保留在該體系下增強明顯,不受輔料空白影響,可實現(xiàn)較好的保留與分離。



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