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制備譜圖峰分叉?我們有辦法,不用怕!

更新時(shí)間:2019-07-05 點(diǎn)擊次數(shù):2871

大家好,我們的答疑解惑板塊好久不見(jiàn)咯~

小編近收到了許多關(guān)于制備柱使用維護(hù)的一些問(wèn)題,今天小編就整理了幾個(gè)大家提問(wèn)頻率比較高的,比如:制備譜圖中出現(xiàn)峰分叉、流速的壓力、填料耐壓多少以及使用等方面的問(wèn)題,并邀請(qǐng)來(lái)月旭科技的技術(shù)工程師來(lái)為大家解答。一起來(lái)看看吧~

Q1、制備譜圖中出現(xiàn)峰分叉,可能有哪些原因,該怎么辦?

峰分叉又稱(chēng)為裂峰,有可能是色譜柱以外的色譜條件發(fā)生了變化,或者色譜柱本身受損發(fā)生了變化。

A、樣品濃度較高,上樣量較大,導(dǎo)致峰分叉;只需要減少上樣量即可。

B、色譜柱柱頭被污染引起的峰分叉;使用合適的溶劑沖洗色譜柱。

C、柱壓太高致使柱頭塌陷引起峰分叉;在柱頭端增補(bǔ)填料或者更換新色譜柱。

D、溶解樣品的強(qiáng)度比流動(dòng)相強(qiáng),溶劑效應(yīng)引起峰分叉;使用流動(dòng)相溶解樣品即可。

E、固體顆粒堵塞分配器,分配不均勻?qū)е路宸植?;更換柱頭端分配器即可。

 

Q2、我要單次上樣0.5-1g樣品,請(qǐng)問(wèn)我該用什么制備柱?

建議使用30*250mm或者50*250mm的制備柱?;幙梢园凑彰?00g填料可以上樣1g樣品的方法進(jìn)行簡(jiǎn)單的計(jì)算,得到應(yīng)該使用多大的制備柱或者相應(yīng)的填料量。多肽樣品由于自身的特殊性,純化同樣質(zhì)量的樣品,需要更多的填料。一般認(rèn)為多肽樣品100g填料可以上樣0.1g樣品。

 

Q3、我購(gòu)買(mǎi)了一根Ultimate  XB-C18,5um,21.2*250mm,請(qǐng)問(wèn)該柱的流速、壓力是多少?

正常情況下,21.2mm色譜柱的zui jia流速20mL/min。我們公司該色譜柱出廠(chǎng)使用甲醇:水=75;25測(cè)試,壓力為15Mpa。其他型號(hào)的制備柱流速可以參考下表。

 

Q4、我要裝填DAC,請(qǐng)問(wèn)你們的填料耐壓是多大的?會(huì)不會(huì)導(dǎo)致填料壓碎?

DAC裝填時(shí),為了確保填料不被壓碎,需要在填料能夠承受的壓力范圍內(nèi)裝填。月旭色譜填料采用特殊的加工處理工藝,使填料耐壓性能更好,有利于DAC的裝填。填料的耐壓情況參考下表:

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