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陰離子交換柱使用特性及維護(hù)

更新時(shí)間:2017-01-16 點(diǎn)擊次數(shù):3512
陰離子交換柱是以離子交換劑為固定相,依據(jù)流動(dòng)相中的組分離子與交換劑上的平衡離子進(jìn)行可逆交換時(shí)的結(jié)合力大小的差別而進(jìn)行分離的一種層析方法。陰離子交換柱中,基質(zhì)是由帶有電荷的樹脂或纖維素組成。
 
陰離子交換柱的使用特性
1. 常用于分離在水溶液中呈陰離子態(tài)的化合物;
2. 陰離子交換柱能與水和有機(jī)溶劑兼容,可用甲醇、乙腈和水(包括緩沖鹽溶液)作流動(dòng)相進(jìn)行分析;
3. 陰離子化合物的保留能力與流動(dòng)相的pH、離子強(qiáng)度、流動(dòng)相中有機(jī)相的比例以及溫度有關(guān)。通常離子強(qiáng)度越大保留時(shí)間越短,流動(dòng)相中有機(jī)相的比例越大保留時(shí)間越長;
4. 檸檬酸鹽和磷酸鹽等緩沖鹽通常用于調(diào)整流動(dòng)相的pH和離子強(qiáng)度以改善分離度,但不應(yīng)超過其pH范圍;
5. 陰離子交換柱的平衡時(shí)間相對C18而言較長。
 
陰離子交換柱的維護(hù)
1. 流動(dòng)相抽濾過0.45um濾膜,樣品針筒過濾;
2. 使用前,先用過渡流動(dòng)相以1.0ml/min過渡30min,然后用流動(dòng)相走基線,基線平穩(wěn)后進(jìn)樣;使用后,先用純水以1.0ml/min反向沖洗色譜柱40min;然后用40%甲醇反向沖洗40min,保存;過渡流動(dòng)相,是指有機(jī)相和水相比例與流動(dòng)相相同,只是過渡流動(dòng)相不含緩沖鹽;
3. 使用保護(hù)柱和預(yù)柱以延長色譜柱的使用壽命;
4. 再生:反方向接柱,流速0.4ml/min,分別洗脫30ml,依次為1M硝酸銨—40%甲醇溶液—異丙醇—水—洗脫液,然后按規(guī)定方向裝柱,用洗脫液洗脫至平衡。

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