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基礎(chǔ)打好才能走的更遠(yuǎn)!來看看固相萃取的基本原理

更新時(shí)間:2023-05-08 點(diǎn)擊次數(shù):1238

01 相關(guān)術(shù)語

1. 預(yù)處理(condition):使SPE柱達(dá)到萃取的最佳狀態(tài),以便吸附目標(biāo)化合物。(活化 平衡)

2. 洗滌(wash):目的是將干擾目標(biāo)化合物分析的雜質(zhì)在洗脫前去除。(淋洗)

要求:最大限度去除雜質(zhì),而對(duì)目標(biāo)化合物沒有明顯損失。     

3. 洗脫(eluton):用適當(dāng)?shù)娜軇⒛繕?biāo)化合物從SPE柱上洗脫出來。

溶劑應(yīng)選擇:最大限度地將目標(biāo)化合物洗脫,共洗脫雜質(zhì)越少越好。

4. 載樣(load):即樣品上樣。樣品載入并通過SPE柱的過程。(上樣)

5. 干擾物(interferences):也稱雜質(zhì)。是指對(duì)目標(biāo)化合物的萃取或檢測起到負(fù)面作用的物質(zhì)。

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02 基本原理

利用固體吸附劑(填料)對(duì)于液體樣品中的目標(biāo)化合物和干擾化合物進(jìn)行有選擇地吸附,然后用溶劑洗脫,達(dá)到去除干擾或富集目標(biāo)化合物的目的。

本質(zhì):固相吸附劑上官能團(tuán)與目標(biāo)化合物的官能團(tuán)之間的作用力。


項(xiàng)目案例

 液相上的分離 

01 非極性作用力 ——

反相吸附劑/非極性吸附劑/疏水型吸附劑

固相萃取材料官能團(tuán)上的碳?xì)滏I與目標(biāo)化合物的碳?xì)滏I之間的力——范德華力、色散力。

例:C18(Si-)、C8(Si-)、C4(Si-)、C2(Si-)、PHE(苯基)(Si-)、CH(環(huán)己基)(Si-)、石墨炭黑、多孔石墨化碳、PSD等。通常非極性的反相SPE柱比較適用于從極性基質(zhì)中萃取分離非極性及中等極性的目標(biāo)物。

02 極性作用力 ——

正相吸附劑/極性吸附劑

固相萃取材料極性表面與樣品中目標(biāo)化合物的極性官能團(tuán)之間的力——?dú)滏I、誘導(dǎo)力、偶極-偶極相互作用、π-π相互作用等。

常見極性官能團(tuán):羥基、胺基、巰基、羰基、芳香環(huán)以及含氧、氮、硫、磷等雜原子基團(tuán)。

在極性作用力的固相萃取中,樣品的基質(zhì)多為非極性,目標(biāo)化合物多含有極性較大的官能團(tuán)。

例:Si、氧化鋁、Diol(二醇基)、NH2(氨基)、CN(氰基)等;

石墨炭黑和多孔石墨化碳也可以用于對(duì)極性化合物的萃取。

03 離子作用力 ——

離子交換型吸附劑

發(fā)生在帶相反電荷的目標(biāo)物與固相萃取吸附劑官能團(tuán)之間——靜電吸引;

三種作用力中強(qiáng)度最大、選擇性最好。

有效萃取的條件:

1)環(huán)境的pH必須使目標(biāo)化合物和吸附劑帶相反電荷;

2)環(huán)境不能含有高濃度的帶有和目標(biāo)化合物相同電荷的競爭化合物。

例:PSA(Si-)、PRS(Si-)、SAX(Si-)、SCX(Si-)、WCX(Si-)、MCX(PS-DVB-)、MAX(PS-DVB-)、PWAX(PS-DVB-)等。

04 多種作用力 ——

次級(jí)相互作用

例:以鍵合硅膠為吸附劑的固相吸附填料(鍵合硅膠本身的硅羥基),GCB/PSA、GCB/NH2等。

05 分子識(shí)別機(jī)理 ——

免疫親和固相萃?。↖ASPE)

免疫親和柱中含有和目標(biāo)物抗體結(jié)合在一起的凝膠,樣品中的目標(biāo)毒素經(jīng)過提取、過濾、稀釋,然后緩慢的通過親和層析柱,在免疫親和柱內(nèi)目標(biāo)物與抗體結(jié)合,其他的無關(guān)物質(zhì)不會(huì)結(jié)合而直接通過免疫親和柱,之后洗滌免疫親和柱wan全除去沒有被結(jié)合的其他無關(guān)物質(zhì)。最后加入甲醇將目標(biāo)物釋放,然后注入到分析儀器中進(jìn)行進(jìn)一步的檢測。

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