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色譜柱填料板結(jié)原因剖析及解決方案

更新時(shí)間:2022-10-28 點(diǎn)擊次數(shù):1341

在色譜柱使用過程中,會(huì)出現(xiàn)柱壓高,峰形差等現(xiàn)象,其主要原因是色譜柱填料污染導(dǎo)致的,其中填料板結(jié)是填料污染中特殊的一種,下面將對(duì)色譜柱填料板結(jié)進(jìn)行原因剖析及解決方案。


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填料板結(jié)的表現(xiàn)

色譜柱填料板結(jié),色譜柱打開后會(huì)發(fā)現(xiàn),填料顏色不變,但填料成片狀、塊狀、結(jié)晶等結(jié)塊現(xiàn)象。

填料板結(jié)的原因分析及解決方案

1、鹽析

解決方案:

1)不管是新色譜柱或已經(jīng)使用過的色譜柱,使用含鹽的流動(dòng)相都先使用與流動(dòng)相組成比例相同但不含鹽的溶液進(jìn)行沖洗置換(避免使用純水),時(shí)間建議30個(gè)柱體積以上。

2)流動(dòng)相置換,在方法開發(fā)過程中,多數(shù)情況會(huì)涉及不同緩沖鹽體系和不同有機(jī)相體系的各種嘗試,那么在調(diào)整、更換流動(dòng)相組成的過程中,請(qǐng)務(wù)必充分考慮到不同種類緩沖鹽的溶解情況。若不確定所使用的緩沖鹽和有機(jī)相之間的互溶情況,可按照不同比例將二者混合,靜置30min,觀察底部是否有沉淀或絮狀物產(chǎn)生。

3)梯度條件,當(dāng)涉及緩沖鹽-有機(jī)相梯度條件時(shí),請(qǐng)確認(rèn)緩沖鹽在梯度條件中有機(jī)相最高點(diǎn)是否能夠充分溶解。當(dāng)然,不確定的時(shí)候也可以和上述方法一樣,將緩沖鹽和有機(jī)相按照梯度最高比例混合后靜置,觀察是否有沉淀產(chǎn)生。

2、流動(dòng)相配制時(shí)間過久,流動(dòng)相長菌,或乙腈等有機(jī)相時(shí)間過久產(chǎn)生絮狀沉淀。

解決方案:流動(dòng)相按需配制,純水相流動(dòng)相一次配制使用不超過12小時(shí)。其他含有機(jī)相流動(dòng)相一次使用不超過24小時(shí),也可根據(jù)實(shí)際情況調(diào)整流動(dòng)相的保質(zhì)期。

3、其他:如膠狀,絮狀等樣品通過過濾無法去除,也會(huì)積壓在篩板和柱頭端,引起柱壓升高。

解決方案:膠狀,絮狀樣品通過工藝,前處理去除干凈后再進(jìn)液相色譜系統(tǒng)。



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