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色譜柱填料污染原因剖析及解決方案

更新時間:2022-09-05 點擊次數(shù):1312

在色譜柱使用過程中,會出現(xiàn)柱壓高,峰形差等現(xiàn)象,其主要原因是色譜柱填料污染導致的,下面將對色譜柱填料污染進行原因剖析及解決方案。


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—— 填料污染的原因剖析 ——

1)中藥類樣品成分復雜,如前處理過于簡單,就很容易引起強保留成分積留在色譜柱入口端,導致色譜柱壓力升高,柱效下降,峰型異常,或在色譜圖中出現(xiàn)“鬼峰"。

2)蛋白類樣品累積:生物類樣品易在柱頭端累積,導致柱壓升高,柱效下降。

3)其他:如膠狀,絮狀等樣品通過過濾無法去除,也會積壓在篩板和柱頭端,引起柱壓升高。




—— 解決方案 ——

1

中藥等成分復雜的樣品

1)在方法開發(fā)時,就盡量采用SPE小柱、萃取等方法盡量多去除一些雜質(zhì)。

2)使用保護柱,需要注意的是,保護柱的柱芯為耗材,不能長期使用不更換,一旦超過柱芯的保護能力,強保留物質(zhì)還是會進入色譜柱,因此,要關(guān)注柱壓,柱壓提高10%以上就建議更換柱芯。

3)對于檢測中藥復雜成分的柱子,建議定期按色譜柱說明書的異常再生方法進行色譜柱維護,目的是定期的去用洗脫能力較強的乙腈,異丙醇去反向沖洗色譜柱,去除柱頭端的強保留物質(zhì)。

4)如檢測這類產(chǎn)品的色譜柱出現(xiàn)超壓,柱效不符合等情況,建議客戶先按說明書的異常再生方法進行處理。如還是不能解決,再按公司的有關(guān)規(guī)定,申請維修。

2

蛋白類樣品累積

1)使用SPE等更加有效的前處理方法。

2)定期進行色譜柱維護沖洗,推薦去除蛋白溶劑(乙腈-水-三氟yi酸 = 50-50-0.1)。

3)使用保護柱。

4)因這類原因,柱子一旦出現(xiàn)柱壓升高,柱效下降的情況,維修后能恢復的可能性很小,所以建議客戶在使用過程中去定期維護,并加保護柱。

3

其它

如膠狀,絮狀等樣品通過過濾無法去除,也會積壓在篩板和柱頭端,引起柱壓升高。這一類,最好在樣品處理或工藝上去解決。



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