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GPC的應(yīng)用之植物油中9種抗氧化劑的測(cè)定分享

更新時(shí)間:2022-09-05 點(diǎn)擊次數(shù):1004


實(shí)驗(yàn)室配置了GPC,有什么用呢?


樣品的性質(zhì)不同,對(duì)應(yīng)的分離原理不同,如果前處理過程中增加GPC,等于增加了分離或凈化的過程。

微信截圖_20220905141954.png

在對(duì)各類食品、農(nóng)產(chǎn)品、水產(chǎn)品和中藥材中的農(nóng)殘、半揮發(fā)性有機(jī)物分析時(shí),樣品中一般會(huì)含有大分子物質(zhì)(如色素、油脂等),如果不去除這些物質(zhì),會(huì)影響最終的分析結(jié)果及色譜柱的使用壽命。


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時(shí)間。

針對(duì)此問題,在農(nóng)殘、半揮發(fā)性有機(jī)物的樣品分析前,必須進(jìn)行有效的凈化前處理。如果實(shí)驗(yàn)室中有GPC那就事半功倍了。接下來我們不妨了解一下GPC在液相中的應(yīng)用。

GPC的分離原理

……

一種含有不同分子的樣品溶液緩慢地流經(jīng)凝膠色譜柱時(shí),各分子在柱內(nèi)同時(shí)進(jìn)行著兩種不同的運(yùn)動(dòng):垂直向下運(yùn)動(dòng)和無定向的擴(kuò)散運(yùn)動(dòng)。

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大分子物質(zhì)由于直徑較大,不易進(jìn)入凝膠顆粒的微孔,而只能分布顆粒之間,所以在洗脫時(shí)向下移動(dòng)的速度較快。

圖片

小分子物質(zhì)除了可在凝膠顆粒間隙中擴(kuò)散外,還可以進(jìn)入凝膠顆粒的微孔中,即進(jìn)入凝膠相內(nèi),在向下移動(dòng)的過程中,從一個(gè)凝膠內(nèi)擴(kuò)散到顆粒間隙后再進(jìn)入另一凝膠顆粒,如此不斷地進(jìn)入和擴(kuò)散,小分子物質(zhì)的下移速度落后于大分子物質(zhì),從而使樣品中分子大的先流出色譜柱,中等分子的后流出,分子最小的最后流出。

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樣品洗脫圖

GPC的作用

……

● 凈化樣品,去除樣品中的大分子基質(zhì)或者小分子干擾物質(zhì),凈化后適合采用GC,HPLC,GCMS等儀器的分析,例如食用油中抗氧化劑、多環(huán)芳烴等的測(cè)試,須通過凝膠凈化前處理方式去除油脂等干擾物,將待分析物和干擾物分離開。

 保護(hù)分析儀器及色譜柱,防止大分子物質(zhì)堵塞后續(xù)分析用色譜柱及儀器。

GPC的應(yīng)用案例

……

植物油中9種抗氧化劑的測(cè)定(凝膠滲透色譜法)。

01

適用范圍

食品中PG、THBP、TBHQ、NDGA、BHA、Ionox-100、OG、DG和BHT等九種抗氧化劑的測(cè)定。

參考標(biāo)準(zhǔn):《GB 5009.32-2016 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中9種抗氧化劑的測(cè)定》。

02

原理

油脂樣品經(jīng)有機(jī)溶劑溶解后,使用凝膠滲透色譜(GPC)凈化。

03

標(biāo)準(zhǔn)溶液的配置

分別稱取沒食子酸丙酯(PG),叔丁基對(duì)苯二酚(TBHQ),去甲二氫愈木創(chuàng)酸(NDGA),叔丁基對(duì)羧基茴香醚(BHA),2, 6-二叔丁基-4-羧甲ji苯酚(lonox-100),沒食子酸辛酯(OG),2, 6-二叔丁基對(duì)甲ji苯酚(BHT),沒食子酸十二酯(DG)10mg,用乙腈溶解并定容到10mL,得1000μg/mL的單標(biāo)。

稱取2, 4, 5-三羧基苯丁酮(THBP)1mg,用乙腈溶解并定容到10mL,得單標(biāo)100μg/mL。

流動(dòng)相配制:1L環(huán)己烷和1L乙酸乙酯等比例混勻。

04

提取步驟

精確稱取取1g油樣于10mL容量瓶中,以流動(dòng)相定容至刻度,待凈化。

加標(biāo)過程:精確稱取取1g油樣于10mL容量瓶中,精確加入0.2mL100μg/mL9種抗氧化劑混標(biāo),以流動(dòng)相定容至刻度,得加標(biāo)量為20mg/kg,上機(jī)濃度為5μg/mL。

05

凝膠色譜凈化條件

GPC譜圖

儀器型號(hào):月旭科技GPC1600凝膠色譜儀。

色譜柱型號(hào):月旭Bio-Beads S-X3凝膠色譜柱,400mm×25mm;

流動(dòng)相:乙酸乙酯-環(huán)己烷(1:1);

流速:5.0mL/min;

進(jìn)樣量:5.0mL;

收集時(shí)間:14-25min;

波長(zhǎng):254nm。

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06

液相色譜分析條件

色譜柱:月旭Ultimate® XB-C18,5μm,4.6×250mm。

流動(dòng)相:A:0.5%甲酸水溶液;B:甲醇;

流速:1mL/min;

進(jìn)樣量:5μL;

柱溫:35℃;

檢測(cè)波長(zhǎng):280nm;

梯度洗脫表:見表1。

表1 梯度洗脫表

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07

液相色譜圖和加標(biāo)回收率結(jié)果



結(jié)果展示

GPC-1600凝膠色譜儀加標(biāo)回收率匯總表


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我們可以看到使用月旭凝膠柱對(duì)植物油中9種抗氧化劑凈化提取,回收率80-101%,結(jié)果滿足要求。


產(chǎn)品信息

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