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高效液相色譜定量分析的誤差來(lái)源與消除

更新時(shí)間:2022-07-19 點(diǎn)擊次數(shù):3318

要提高分析結(jié)果的準(zhǔn)確度,

必須考慮在分析過(guò)程中可能產(chǎn)生的各種誤差,

采取有效措施,

將這些誤差減到最小。



01 樣品處理過(guò)程中誤差的來(lái)源

樣品的處理包括稱(chēng)量、溶解到標(biāo)記稀釋等步驟。樣品處理要盡量減少操作者的技術(shù)問(wèn)題帶來(lái)的誤差,樣品的稀釋次數(shù)、稀釋工具都是誤差的來(lái)源。




02 手動(dòng)進(jìn)樣誤差的來(lái)源

作為進(jìn)樣主力,仍是手動(dòng)進(jìn)樣器。如果使用方法不當(dāng),會(huì)引起色譜圖問(wèn)題,標(biāo)準(zhǔn)曲線無(wú)線性,重復(fù)性差。定期對(duì)進(jìn)樣閥清洗和保養(yǎng),可避免由進(jìn)樣閥引起的污染和堵塞,排除干擾峰,提高準(zhǔn)確性。進(jìn)樣量要大于定量環(huán)的3倍以上,這樣才能防止部分樣品由溢流管溢出從而導(dǎo)致定量分析的誤差。




03儀器系統(tǒng)誤差的來(lái)源

輸液泵

在分析中因輸液泵的故障而引起分析結(jié)果的不準(zhǔn)確是很常見(jiàn)。如塵埃、垃圾等污染物進(jìn)入輸液流道內(nèi),引起配管堵塞,單向閥污染引起壓力不穩(wěn),密封墊損壞導(dǎo)致系統(tǒng)漏液,柱塞桿損壞引起無(wú)流動(dòng)相流出,壓力波動(dòng)。保證輸液泵的穩(wěn)定和正常運(yùn)行對(duì)分析結(jié)果的準(zhǔn)確性、降低誤差是非常重要的。

流動(dòng)相引起流動(dòng)相組成變化

配置引起的誤差、線上混合泵失靈引起的比例誤差、放置后組成的變化。例如使用揮發(fā)性溶劑,真空脫氣引起揮發(fā)性成分的損失;流動(dòng)相吸收空氣中二氧化碳引起pH改變。流動(dòng)相組成變化對(duì)tR值大的組分影響最大。反相溶劑微小的變化,會(huì)引起保留時(shí)間相當(dāng)大的變化。

溫度的變化

柱上沒(méi)有恒溫裝置,通常會(huì)因溫度引起保留時(shí)間的變化,應(yīng)使用柱溫箱,另外保持室內(nèi)最小溫差。

色譜柱

流動(dòng)相對(duì)色譜柱進(jìn)行沖洗30min后,每隔10min~20min重復(fù)進(jìn)相同的樣品,如保留時(shí)間不變表明已平衡。應(yīng)注意,柱可能對(duì)某一組分平衡,而對(duì)其它組分尚未平衡。因此只有對(duì)所有的組分都平衡,才能正式分析樣品。




04 結(jié)論

圖片

提高操作技能,工作認(rèn)真謹(jǐn)慎,仔細(xì)觀察可以控制的誤差,盡量把能控制的誤差減小到zui低,分析結(jié)果的準(zhǔn)確度將更高。



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