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反相離子對(duì)試劑什么時(shí)候使用?

更新時(shí)間:2021-11-11 點(diǎn)擊次數(shù):2437

在介紹反相離子對(duì)試劑之前,我們先回憶一下離子對(duì)色譜法(Ion-pair chromatography,IPC),離子對(duì)色譜法可被看作是以分離離子樣品為目的的反相色譜法(Reversed-phase chromatography,RPC)的改良形式。IPC與RPC唯yi不同的條件是IPC在流動(dòng)相中添加了離子對(duì)試劑,這些試劑能在平衡過(guò)程與酸性化合物的A-或者堿性化合物的BH+發(fā)生相互作用。

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“ 關(guān)于離子對(duì)試劑 "


離子對(duì)試劑是由強(qiáng)親水離子形成,反作用于樣品分子的中性離子對(duì)。因此,可用于同時(shí)分離帶電分子和非帶電分子。反相離子對(duì)色譜法是把離子對(duì)試劑加入到含水流動(dòng)相中,被分析的組分離子在流動(dòng)相中與離子對(duì)試劑的反離子生成不帶電荷的中性離子,從而增加溶質(zhì)與非極性固定相的作用,使分配系數(shù)增加,改善分離效果。

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一般情況下,在建立HPLC分離方法的時(shí)候,我們推薦由RPC開(kāi)始,接著添加離子對(duì)試劑(僅當(dāng)有需要時(shí))。舉個(gè)例子,當(dāng)我們已知某個(gè)峰是對(duì)應(yīng)一個(gè)酸性物質(zhì)、堿性物質(zhì)或中性物質(zhì)時(shí),我們便能準(zhǔn)確地預(yù)測(cè)出添加的IPC試劑對(duì)溶質(zhì)保留的影響。因此,當(dāng)改變RPC的其他條件仍不能達(dá)到合適的分離度時(shí),我們可以通過(guò)使用IPC試劑不斷改變酸性溶質(zhì)和堿性溶質(zhì)的保留行為從而改善他們的分離效果。

那么,IPC在什么時(shí)候或者應(yīng)用于什么物質(zhì)的分離會(huì)是比較合適的分離方法呢?在樣品出現(xiàn)以下特點(diǎn)時(shí)我們就可以考慮使用離子對(duì)試劑:

(1)在反相色譜柱上不保留或保留弱;

(2)化合物帶有強(qiáng)離子官能團(tuán),如羧基、銨基、氨基等;

(3)化合物在反相體系流動(dòng)相中有足夠的溶解度。

使用離子色譜法可令樣品的保留行為產(chǎn)生類似于改變流動(dòng)相的pH的變化,但是離子對(duì)色譜法能更好的控制酸性溶質(zhì)或堿性溶質(zhì)的保留行為,而且無(wú)須使用ji端的流動(dòng)相pH(如,pH<2.5或pH>8.0)。


“常見(jiàn)的離子對(duì)試劑"


常見(jiàn)的離子對(duì)試劑主要包括如下幾類:

陰離子對(duì)試劑:四丁基氫氧化銨、四丁基溴化銨等堿性試劑,適用于結(jié)構(gòu)式中含磺酸基、羧基等的極性化合物。

陽(yáng)離子對(duì)試劑:甲烷磺酸鈉、戊烷磺酸鈉、己烷磺酸鈉、庚烷磺酸鈉、辛烷磺酸鈉、癸烷磺酸鈉、十二烷基磺酸鈉、十二烷基硫酸鈉等,適用于結(jié)構(gòu)式中含銨基、氨基等的極性化合物。

其他離子對(duì)試劑:高氯酸鈉、三氟yi酸、七氟丁酸等。



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