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高效液相色譜柱的再生過程是怎樣的?

更新時(shí)間:2020-11-03 點(diǎn)擊次數(shù):1537
   高效液相色譜柱采用內(nèi)壁經(jīng)過精密加工拋光的不銹鋼管,以獲得高柱效。不銹鋼管耐溶劑、水和緩沖溶液的腐蝕,使用前色譜柱管先用甲醇和水依次清洗,再用50%的hno3對(duì)柱內(nèi)壁作鈍化處理。鈍化時(shí)使hno3在色譜柱管中至少滯留10min,以在柱內(nèi)壁形成鈍化的氧化物涂層。也采用氟塑料、玻璃和玻璃襯里材料,主要是從抗腐蝕和易加工方面考慮。
 
  高效液相色譜柱的再生:
  因?yàn)樯V柱是消耗品,隨著使用時(shí)間或進(jìn)樣次數(shù)的增加,當(dāng)出現(xiàn)色譜峰峰高變低,峰寬加大或出現(xiàn)肩峰時(shí),一般來說可能是柱效下降。
  (1)、反相柱的再生,采用以甲醇:水=90:10(V/V),純甲醇,異丙醇,二氯甲烷等溶劑作流動(dòng)相,順次沖洗,每種流動(dòng)相流經(jīng)色譜柱的量為20~30倍色譜柱體積然后再以相反順序沖洗色譜柱。
 
  (2)、正相柱再生。順次以正己烷、異丙醇、二氯甲烷、甲醇作流動(dòng)相沖洗色譜柱。每步注意平衡溶劑的順序,不要顛倒。每種流動(dòng)相流經(jīng)色譜柱的量為20-30倍柱體積(因異丙醇的粘度較大,沖洗過程中請(qǐng)注意調(diào)整沖洗的流速),用甲醇沖洗完后,再以相反的順序沖洗色譜柱。要注意上述溶劑必需嚴(yán)格脫水。另外,請(qǐng)清洗前嚴(yán)格熟讀色譜柱說明書,了解哪些溶劑不可用。
 
  (3)、離子交換柱的再生。長(zhǎng)時(shí)間在高pH值和高離子強(qiáng)度緩沖溶液中使用,將導(dǎo)致色譜柱離子交換能力降低。用稀酸緩沖溶液沖洗,可使陽離子柱再生;反之,用稀堿緩沖溶液沖洗,可使陰離子柱再生。
 
  以上色譜柱的再生方法并不是的標(biāo)準(zhǔn)方法,使用者可根據(jù)自己的實(shí)際經(jīng)驗(yàn)和目的,選擇合適的并能溶解柱內(nèi)污染物的溶劑作流動(dòng)相,按正方向或反方向的沖洗。

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