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干貨∣掌握固相萃取小知識(shí),輕松應(yīng)對(duì)SPE方法開(kāi)發(fā)

更新時(shí)間:2020-05-23 點(diǎn)擊次數(shù):2504

填料為正相吸附劑和反相吸附劑主要用來(lái)分析哪些化合物呢?

 首先,我們先簡(jiǎn)要了解一下反相萃取與正相萃取的吸附機(jī)理。

 

反相作用機(jī)理:

反相萃取分離主要是利用固相萃取材料官能團(tuán)上的碳?xì)滏I與目標(biāo)化合物的碳?xì)滏I之間的非極性作用力。通常,非極性的反相SPE柱較為適用于從極性基質(zhì)中萃取分離非極性及中等極性的目標(biāo)化合物。

 

對(duì)于通過(guò)非極性作用力吸附在非極性SPE柱上的目標(biāo)化合物,可以用具有非極性性質(zhì)的溶劑洗脫,如氯f(wàn)ang、環(huán)己烷、乙酸乙酯等。只要溶劑的洗脫強(qiáng)度足以破壞目標(biāo)化合物與吸附劑非極性官能團(tuán)之間的范德華力,就可以順利地將目標(biāo)化合物從SPE柱上洗脫下來(lái)。即便是極性較強(qiáng)的甲醇,對(duì)于許多化合物來(lái)說(shuō)也具有足夠的非極性作用力將其洗脫。有時(shí)單一溶劑不能把疏水性強(qiáng)的目標(biāo)化合物*洗脫下來(lái),則可考慮使用二氯甲烷:乙酸乙酯(1:1,體積比)。

 

反相固相萃取模式下,溶劑體系的極性應(yīng)按照樣品溶劑、淋洗溶劑、洗脫溶劑的順序逐漸降低,而它們的洗脫強(qiáng)度逐漸增大。必須保證選擇的樣品溶劑不能將目標(biāo)化合物洗脫,選擇的淋洗液應(yīng)在不洗脫目標(biāo)化合物的前提下大限度地洗脫干擾物,所選洗脫液應(yīng)能恰好*洗脫目標(biāo)化合物。

 

正相作用機(jī)理:

極性作用力發(fā)生在許多固相萃取材料極性表面與樣品中目標(biāo)化合物的極性官能團(tuán)之間。常見(jiàn)的具有極性作用力的吸附劑在色譜中一般都稱為正相色譜吸附劑。極性作用力的強(qiáng)度比非極性作用力要大,但比離子作用力的強(qiáng)度小。常見(jiàn)的極性官能團(tuán)包括羥基、胺基、巰基等。

 

非極性的基質(zhì)環(huán)境有利于吸附劑和目標(biāo)化合物之間的極性作用力,因?yàn)榉菢O性溶劑沒(méi)有能夠與極性固定相材料形成氫鍵的官能團(tuán)。因此,在極性作用力的固相萃取中,樣品的基質(zhì)多為非極性的,如正己烷、二氯甲烷、菜油等,而目標(biāo)化合物多含有極性較大的官能團(tuán)。

 

常見(jiàn)的極性固定相萃取材料包括:硅膠、氧化鋁、弗羅里硅土及含有氰基(CN)、氨基(NH2)、二醇基(2OH)的鍵合硅膠。

 

正相固相萃取模式下,溶劑體系的極性應(yīng)按照樣品溶劑、淋洗溶劑、洗脫溶劑的順序逐漸升高,它們的洗脫強(qiáng)度也逐漸增大。必須保證選擇的樣品溶劑不能將目標(biāo)化合物洗脫,選擇的淋洗液應(yīng)在不洗脫目標(biāo)化合物的前提下大限度地洗脫干擾物,所以洗脫液應(yīng)能恰好*洗脫目標(biāo)化合物。

 

加上之前為大家介紹的離子交換固相萃取技術(shù),現(xiàn)在又面對(duì)反相、正相固相萃取,如此之多的吸附機(jī)制,實(shí)際應(yīng)用中我們?cè)撨x哪一個(gè)呢?下面小編就為大家做一個(gè)具體的分析。

 

由于許多化合物同時(shí)具有多種官能團(tuán),在選擇固相萃取機(jī)理時(shí),應(yīng)該根據(jù)目標(biāo)化合物干擾物的性質(zhì)來(lái)考慮采用哪種萃取機(jī)理較為有利。如:2-萘胺是一個(gè)弱堿性化合物(pKa=4.16),在一定的pH條件下還可以呈陽(yáng)離子狀態(tài),同時(shí)該化合物具有疏水的非極性官能團(tuán)及親水的極性官能團(tuán)。這時(shí),就應(yīng)該根據(jù)樣品基質(zhì)的具體情況來(lái)選擇有利于將目標(biāo)化合物與干擾物分離的萃取機(jī)理。如果樣品基質(zhì)中同時(shí)含有大量的非極性干擾雜質(zhì),就應(yīng)該避免采用非極性的萃取機(jī)理,而將樣品的pH調(diào)節(jié)到低于其pKa兩個(gè)pH單位,即pH=2.16,并采用陽(yáng)離子交換機(jī)理。反之,如果樣品中同時(shí)含有大量的陽(yáng)離子干擾雜質(zhì),則應(yīng)該調(diào)節(jié)樣品的pH至6.16(高于pKa兩個(gè)單位),采用非極性萃取機(jī)理較為有利。

 

 

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